Masi Uchunguzi: muda halisi PCR

Hivi sasa, uchunguzi wa molekuli mfumo iliyoundwa kwa polimerasi (PCR), ambayo ilikuwa msukumo kwa ajili ya maendeleo ya idadi kubwa ya mbinu za uchunguzi wa magonjwa, kulingana na uamuzi wa nyenzo za jeni. Kwa ajili ya kufanya muda halisi PCR kutumia jeni kipande (hususan asidi nucleic) ya wakala causative, ambayo haipatikani katika watu wengine.

The kanuni ya PCR yaani the kuzidisha ya a fulani kisababishi magonjwa DNA kipande mamilioni ya mara kwa DNA polima katika a maalum kitengo, inajulikana kama the mafuta Cycler, ambayo inatoa a mzunguko marudio ya the joto serikali kwa a GIVEN mpango.

Uchunguzi PCR inaruhusu kurudia a mfululizo wa amplifications, kudumisha the enzyme shughuli. Wakati the kujiongezea nguvu unafanyika vizuri, katika moja ya mzunguko the idadi ya nakala za a hasa kipande cha DNA ya the kisababishi magonjwa mara mbili, baada ya thelathini mzunguko - a mia moja na kumi. Hii ndiyo sababu PCR ni kutumika katika utambuzi wa kuamua ndogo vimelea kutosha, utambuzi wa ambayo ni vigumu bila yake.

Ikumbukwe kwamba RNA hawezi kuwa kigezo kwa ajili ya PCR katika muda halisi. Kwa hiyo, ili kugundua RNA ya virusi kabla ya kujiongezea nguvu kupata DNA uhusiano na kipande sambamba yake. polimerasi inaruhusu kuzalisha DNA na RNA kipimo kisababishi magonjwa. The taarifa hiyo hupatikana ni kutumika kwa ajili ya ufuatiliaji the ufanisi wa tiba kutumika, na the tathmini ya the kliniki ubashiri.

Aidha, muda halisi PCR hauhitaji hatua za ziada kuhusiana na decryption ya lengo DNA au amplicons, ambayo kutumika kama kikwazo cha utambuzi sahihi na kusababisha matokeo ya uongo. Mbinu hii inawezesha kutotumia electrophoresis hatua, ambayo inaongoza kwa bidhaa hatari kupunguza polimerasi. Pia, kutokana na kupungua kwa idadi ya manipulations na wakala, hupunguza muda wa utafiti, ni simplifies mchakato, hupunguza uwezekano wa makosa. PCR pia inakuwezesha kubainisha idadi ya awali ya nakala za DNA kwa viini vya magonjwa katika majaribio ya kliniki kusaidia kutambua vipindi vya exacerbations na kuchukua hatua kwa wakati kutibu wagonjwa.

Leo, kuna idadi kubwa ya njia ya kujiongezea nguvu ya kuwabainishia katika muda halisi. The kawaida kutumika mbalimbali mbinu ya kutumia amplicon uhusiano na fluorogenic probes, the mionzi ukubwa wa ambayo inatofautiana kulingana na the mkusanyiko wa amplicon na kumbukumbu katika za moja kwa moja kwa njia ya a maalum chombo kinachoitwa a thermocycler na an macho moduli. Ni inatoa kiwango cha juu cha unyeti wa uchambuzi. Wakati the huo PCR bidhaa yanaweza kutambuliwa, pamoja na a kubwa wingi wa kwa mazao, katika a muda wakati wa kutumia electrophoresis ni wakati mwingine si niliona.

By PCR kutumia mazuri na mabaya ya udhibiti sampuli mali wakati. Hivyo, sampuli chanya na hasi katika utafiti kuchambuliwa kama sampuli tofauti, sampuli kudhibiti ambayo ni kuletwa katika kila sampuli hiyo na hupita hatua zote uchambuzi.

Leo, kuna idadi kubwa ya vifaa kwa ajili ya kufanya polimerasi. Hizi ni pamoja na Bio-Rad, Applied Biosystems, Cepheid na Roche. Kila mmoja wao ana faida na hasara

Ikumbukwe kwamba PCR - njia ya utambuzi kutumika katika kiasi kikubwa kisayansi, utafiti na vituo vya uchunguzi duniani kote, kwa sababu inatoa nafasi ya kufanya tafsiri ya haraka ya matokeo.